Мини-планшетные центрифуги для очистки рекомбинантных белков

Мини-планшетные центрифуги для очистки рекомбинантных белков

Введение:

Рекомбинантные белки стали бесценным инструментом в различных областях исследований, включая биохимию, биотехнологию и медицину. Обычно их производят в больших количествах с использованием генно-инженерных организмов, таких как бактерии или дрожжи. Однако очистка этих белков из клеток-хозяев или культуральной среды может оказаться сложной задачей. Одним из важнейших методов очистки белков является центрифугирование, которое помогает отделить нужный белок от других клеточных компонентов. В последние годы мини-планшетные центрифуги стали удобным и эффективным инструментом для очистки рекомбинантных белков.

1. Важность очистки белка:

Очистка белков является важным шагом в понимании структуры, функций и взаимодействий белков. При работе с рекомбинантными белками процесс очистки становится еще более важным. Это позволяет исследователям получить высокоочищенный образец белка, свободный от примесей, что важно для последующих приложений, таких как структурные исследования, ферментативные анализы и терапевтические разработки.

2. Проблемы очистки белков:

Очистка рекомбинантных белков может быть сложным процессом из-за нескольких проблем. Во-первых, целевой белок часто производится в небольших количествах, что затрудняет получение достаточного количества материала для характеристики и функциональных исследований. Во-вторых, интересующий белок часто присутствует в сложной смеси других клеточных компонентов, включая белки клетки-хозяина, ДНК, РНК и другие примеси. Наконец, процесс очистки должен быть эффективным, воспроизводимым и масштабируемым, чтобы соответствовать требованиям крупномасштабного производства белка.

3. Центрифугирование для очистки белка:

Центрифугирование — широко используемый метод в области биологии и биохимии. В нем используется принцип седиментации, при котором частицы жидкой пробы вытесняются на дно пробирки или колодца под действием центробежной силы. Этот процесс помогает разделить различные компоненты в зависимости от их размера, формы и плотности. При очистке белков центрифугирование можно использовать на различных стадиях для удаления нерастворимого материала, сбора клеток или выделения определенных фракций белка.

4. Появление мини-пластинчатых центрифуг:

Традиционные центрифуги часто громоздки, дороги и требуют больших объемов проб. Более того, они могут оказаться непригодными для параллельной обработки, что делает их непригодными для высокопроизводительной очистки белков. Чтобы устранить эти ограничения, в последние годы популярность приобрели мини-центрифуги с вращающимся центрифугой. Эти компактные и доступные центрифуги разработаны специально для использования с многолуночными планшетами и позволяют одновременно обрабатывать несколько образцов.

5. Преимущества мини-центрифуг с центрифугированием для очистки белков:

Мини-центрифуги с центрифугами для планшетов имеют ряд преимуществ перед обычными центрифугами для очистки белков. Во-первых, они способны вмещать стандартные 96- и 384-луночные планшеты, что обеспечивает высокую производительность обработки. Эта особенность делает их идеальными для скрининга больших библиотек рекомбинантных белков или изучения белок-белковых взаимодействий. Во-вторых, эти центрифуги занимают небольшую площадь, что экономит драгоценное пространство лабораторного стола. Кроме того, они оснащены эффективными системами охлаждения, которые предотвращают деградацию проб при длительном центрифугировании.

6. Рабочий процесс с использованием мини-центрифуг с центрифугами:

Рабочий процесс очистки белка с использованием мини-планшетных центрифуг обычно включает следующие этапы:

1. Лизис клеток: клетки, экспрессирующие рекомбинантный белок, лизируются для высвобождения интересующего белка.

2. Уточнение: клеточный лизат центрифугируют на низкой скорости для удаления крупных остатков, таких как клеточные мембраны и осажденные белки.

3. Аффинная очистка. Очищенный лизат наносят на колонку или планшет, содержащий смолу, специфичную для целевого белка. После серии стадий промывки очищенный белок элюируется, в результате чего образуются фракции высокой чистоты.

4. Концентрирование: Очищенный белок концентрируют с помощью центробежных концентраторов, избегая использования методов ультрафильтрации или осаждения.

5. Хранение и анализ. Концентрированный образец белка хранится при необходимых условиях для дальнейшего анализа или последующего применения.

Заключение:

Мини-пластинчатые центрифуги произвели революцию в области очистки белков, позволив исследователям быстрее и эффективнее получать образцы белков высокой чистоты. Благодаря своим компактным размерам, высокой пропускной способности и способности обрабатывать небольшие объемы образцов эти центрифуги стали незаменимым инструментом для любой лаборатории, занимающейся производством и очисткой рекомбинантных белков. Поскольку технологии продолжают развиваться, мини-центрифуги с центрифугами, вероятно, будут играть решающую роль в продвижении исследований белков и их применении в различных научных дисциплинах.